Skip to content

dental plus szczecin opinie

2 miesiące ago

524 words

Rodzinne rodowody i haplotypy dla markerów mikrosatelitarnych z chromosomu 14q w dwóch rodzinach. Regiony zapakowane w pudełka wskazują allele chorób homozygotycznych. Minimalny odstęp między kandydatami obejmujący locus choroby to region pomiędzy markerami D14S742 i D14S1280. Figura 3 Identyfikacja homozygotycznej substytucji G-to-A w pierwszej zasadzie następującej po kodonie terminacji (* 1) w TRAC. (A) Ślady sekwencji TRAC typu dzikiego i zmutowane. Pozycja zmiany sekwencji * 1G> A u pacjentów jest oznaczona strzałkami. Sekwencja w pudełku przedstawia sygnał zakończenia translacji tetranukleotydu. (B) Analiza RTC-PCR TRAC pokazująca pominięcie egzonu 3, który rozdziela się w obrębie dwóch rodzin. (C) Schemat pokazujący strukturę eksonów i domeny zmutowanego i natywnego splicingu mRNA i ślad sekwencji z RT-PCR TRAC, w wyniku pominięcia egzonu 3 (struktura eksonów zaadoptowana z repertuaru IMGT, http://www.imgt.org/textes / IMGTrepertoire /). Rozważając możliwe mechanizmy chorobowe, najpierw zbadaliśmy, czy substytucja TRAC c. * 1G> A może sprzyjać znacznemu wzrostowi odczytu kodonu terminacji, jak to wcześniej wykazano dla niektórych ssaczych mRNA (szczególnie w genetycznych miejscach przekodowania; pozycje 3, 4). ). W ten sposób porównaliśmy skuteczność terminacji sekwencji typu dzikiego i zmutowanych (osadzonych w typowej sekwencji kontekstowej +6 do +9), umieszczając każdy z dwóch genów reporterowych lucyferazy (RLuc i Luc +) i badając względne aktywności dwóch lucyferaz. w ludzkich hodowanych komórkach. Chociaż zmutowany allel * A był związany ze znaczącym wzrostem liczby sygnałów stopu (w porównaniu z typem dzikim * G), bezwzględna ilość produktu do przejścia była stosunkowo niewielka, co sugeruje, że jest to mało prawdopodobne, aby był mechanizmem choroby in vivo (dane nie pokazane). Następnie postawiliśmy hipotezę, że mutacja c. * 1G> A może upośledzić składanie transkryptu TRAC, ponieważ mutacja mieści się w konsensusie 5. splicuj witrynę. Analiza cDNA TRAC w RT-PCR u członków dwóch dotkniętych rodzin wykazała pominięcie egzonu z ostatniego kodującego eksonu (eksonu 3), co spowodowało, że nieprawidłowy transkrypt dołączał ekson 2 do normalnie nieulegającego translacji eksonu 4 (Figura 3, B i C) ( testowanie dodatkowych alternatywnych wzorów splicingu TRAC przy użyciu starterów zakotwiczonych w eksonie i intronie 3 nie wykryło dalszych transkryptów). W przewidywanym produkcie translacji, aminokwasy 35C-końcowe są zastąpione 56 aminokwasami kodowanymi przez ekson 4 (p.Thr107LeufsX56). Powoduje to częściową utratę łączącej się domeny peptydowej i zniesienie transbłonowych i cytoplazmatycznych domen TCR. łańcuch. Wcześniej, usunięcie zaledwie 9 aminokwasów z C-końca TCR. stwierdzono, że łańcuch zaburza składanie i / lub transport wewnątrzkomórkowy kompleksów TCR-CD3 (5, 6). Dodatkowo zachowany motyw (FETDxNLN), obecny w. wiążąca łańcuch domena peptydowa okazała się mieć kluczowe znaczenie w kontrolowaniu odpowiedzi na antygen (7). W związku z tym oczekuje się, że mutacja splicingu związana z mutacją c. * 1G> A będzie miała głęboki wpływ na TCR. struktura i funkcja łańcucha. Lokalizacja komórkowa i immunoblotting mutanta TRAC. Po ocenie za pomocą cytometrii przepływowej, barwienie powierzchniowe dla TCR. był silnie zredukowany w komórkach pacjenta (ryc. 1)
[hasła pokrewne: przewlekła niewydolność żylna, reumatoidalne zapalenie stawów leczenie, przetoka okołoodbytnicza ]

0 thoughts on “dental plus szczecin opinie”